Co- immunoprecipitatie protocol

co - immunoprecipitatie protocol (Co - IP ) is een veel gebruikte procedure eiwit interactie te analyseren . De procedure wordt algemeen uit drie stappen . Antilichaam wordt ingevoerd om een ​​cellysaat wordt het antilichaam - eiwit complex chemisch gebonden en het eiwit wordt geïdentificeerd door analyse . Co - immunoprecipitatie Samenvatting

Co- IP bestaat uit een reeks stappen om nauwkeurige testresultaten . De eerste stap vereist een antilichaam dat specifiek eiwit worden toegevoegd . In de tweede stap , proteïne - G of proteïne - A sefarose wordt gebruikt om het antilichaam - eiwit complex te binden . Tenslotte sequencing een gezuiverd eiwit band , of Western blot analyse wordt gebruikt om de co - geprecipiteerde eiwitten te identificeren .
Algemene stappen

Het protocol kan worden onderverdeeld in drie algemene stappen in termen van de mechanica van het proces . De eerste stap is workflow om de procedure te voltooien in de minste hoeveelheid tijd . De tweede stap is de algemene overwegingen voor de procedure . De laatste stap is het oplossen van problemen .
Specifieke stappen

De workflow begint met de voorbereiding van de cultuur voor de blotting analyse en besluit met de bepaling van de aanwezigheid van een eiwitten . Algemene overwegingen bestaan ​​belangrijke stappen zoals voorreiniging de keuze van buffers en selectie van Proteïne A of Proteïne G hars . Problemen behandelt thema's geen detectie van eiwit binding van de antilichamen tegen eiwitten , antilichaam fragmenten en de mogelijkheid van een mislukte Co- IP .