Gezondheid en ziekte gezondheid logo
Algemene Gezondheidszorg Industrie

Hoe Stain Agarosegels

Visualisatie van nucleïnezuur of eiwit essentieel uitvoeren agarose gelelektroforese . Als u werken zonder het kleuren van de gel , zult u niet in staat om te zien waar het monster u test heeft bereikt , en daarom metingen van moleculaire grootte , bijvoorbeeld, zal worden ernstig beperkt . Vlekken uw onder toepassing van een gemeenschappelijke , goed getest kleurstof zoals ethidiumbromide ( EtBr ) die fluoresceert onder ultraviolet ( UV ) licht wanneer ingelast in DNA -of RNA -moleculen . De kleurstof zal u helpen bij het ​​uitvoeren van uw experiment door te laten zien van de moleculen in je steekproef zo donker blauwe plekken . Wat je
Veiligheid handschoenen en een veiligheidsbril
Agarosegel
Ethidiumbromide
Pipette ( Gilson voor kleine hoeveelheden ) op Laadbuffer
Toon meer instructies
1

Draag veiligheidshandschoenen die dun maar beschermend zijn en laat je vingers en handen onbeperkte beweging. Gebruik een kleine pipet om wat EtBr ( of gelijkwaardig vlek ) trekken uit de verpakking . Kopen van 2

Voeg 0,5 microgram per milliliter van de door u gekozen vlek op uw monster. Bedek het monster en handmatig mengen. Verschillende shakes moet voldoende zijn.
3

Voeg een negatief geladen beladingsbuffer aan de mix met een pipet . Dit maakt het mogelijk de gekleurde monster te worden gezien met het blote oog , in natuurlijk licht en elimineert de noodzaak voor dure , schadelijke UV die anders de moleculen waarin u geïnteresseerd bent zou degraderen. Xyleencyanol is een veelgebruikte laadbuffer , maar anderen zijn beschikbaar . Zorg ervoor dat u een laad- buffer die zal draaien op dezelfde snelheid als het molecuul u meet selecteren . Xyleencyanol draait met dezelfde snelheid als DNA fragmenten die 5000 basenparen ( bp ) in lengte .
4

met een schone pipet om enhanced monster toepassing op de putjes aan het begin van de agarosegel . Het volume u van toepassing afhankelijk van de grootte van de gel kammen ( goed dikte en lengte gel dikte) . Vlekken op uw monster en niet de controle, zodat u de parameters die u geïnteresseerd bent in ( zoals moleculair gewicht ) correct en effectief zijn kan bepalen .
5

alternatief voeren Southern blotting als een manier van het visualiseren van uw monster . Breng het DNA een nitrocellulosemembraan . Blootstellen aan een hybridisatieprobe . Dit is niet vlekken , als zodanig, maar biedt een geschikt alternatief , zoals beschreven door Access Excellence .

Gezondheid en ziekte © https://www.gezond.win