Perfusie Techniek

De perfusie techniek zorgt voor een snelle en gelijkmatige fixatie aan alle individuele cellen aanwezig in weefsel. Een 4 procent paraformaldehyde fixeermiddel wordt via het vasculaire systeem om weefsel van belang te verkrijgen. De belangrijkste target site toediening in een bepaald orgaan kan worden geïdentificeerd met behulp van deze techniek. Perfusie heeft ook geholpen wetenschappers om de structurele en functionele organisatie van de menselijke hersenen te begrijpen. Wat je nodig hebt
Dier (rat of aap) op perfusie pomp, beker
Fixative (4 procent paraformaldehyde) op Twitter Spuit naalden
Perfusie druppelen ingesteld
Schaar
Scalpel
Pincetten
0,9 procent zoutoplossing
Ice box
Toon Meer Aanwijzingen
1

Bereid verse 4 procent paraformaldehyde door het mengen van 40 g paraformaldehyde in 800 ml water. Verwarm de oplossing tot 60 C onder roeren. Koel de oplossing tot 4 ° C. Breng de pH op 9,5 met behulp van een pH meter. Voor het aanpassen van de pH, voeg ijsazijn om de gewenste pH te verkrijgen kopen van 2

Stel de perfusie pomp;. Hechten alle glazen delen en een perfusie naald. Run 100 ml leidingwater via de slang van de perfusie pomp om alle residuen van de glazen onderdelen te verwijderen. Plaats een beker van fixeermiddel in een ice box.
3

Open het einde van de perfusie buis en plaats deze in een fixeermiddel beker. Schaal de volume oplossing volgens de grootte van het dier. Pas nu de perfusie pomp ventiel tot een langzame, gestage druppelen. Sluit de klep. Vul het perfusie apparaat met 0,9 procent (gewicht /volume) zoutoplossing.
4

Stel de operatie-instrumenten in de buurt van de operatietafel. Geef een verdoving injectie aan de dieren volgens het lichaamsgewicht (ketamine 0,5 mg /kg). Plaats het dier op de operatietafel met zijn naar beneden.
5

Wordt snijden met een scalpel, langs de lengte van het membraan. Met de grote schaar, botte kant naar beneden, snijd het bindweefsel onder aan het membraan. Expose het hart. Houd het kloppend hart met de tang en plaats een naald in het linker ventrikel.
6

Open het ventiel van de perfusie pomp om de stroom van 0,9 procent zoutoplossing toe. Zorg ervoor dat de oplossing is vrij stroomt en het dier in leven. Het hart van het dier moet voortdurend kloppen. Zodra het bloed wordt vervangen door de zoutoplossing, verandert de oplossing tot 4 procent paraformaldehyde.
7

Stop de perfusie en ontleden een weefsel van belang. Houd weefsel in hetzelfde medium bij 4 C.