Essentiële Flowcytometrie Methoden

impliceert Flowcytometrie het beginsel van hydrodynamische gericht , met licht excitatie bron, zoals een laser , voor het meten en analyseren van de fysische karakteristieken van individuele deeltjes . Flowcytometrie wordt voornamelijk toegepast voor celanalyse en de eigenschappen geanalyseerd onder celgrootte en granulariteit fluorescentie-intensiteit . Essentiële detectiemethoden gebruikt in flowcytometrie op de toekomst verstrooid licht , side- verstrooid licht en fluorescentie . Doorstroomcytometer

Een stromingscytometer is bestaan ​​uit vloeistofcomponenten , optica en een elektronisch systeem. Het fluidica systeem is verantwoordelijk voor het transport van de monsterstroom naar de laserstraal voor ondervraging . Het optische systeem bevat lasers en optische filters die monsters en direct lichtsignalen branden om de desbetreffende detectoren. Deze gedetecteerde licht wordt omgezet in elektronische signalen door het elektronische systeem , voor interpretatie door de computer .
Forward - Strooilicht

gebroken licht verstrooid in voorwaartse richting wordt gedetecteerd ongeveer 20 graden van de as van de laserstraal door een fotodiode genaamd de -forward verstrooid kanaal ( FSC ) . Forward - strooilicht is recht evenredig met deeltjesoppervlak , en wordt gebruikt als indicator van celgrootte en het onderscheiden tussen levende en dode cellen . Vanwege deze kenmerken , wordt FSC toegepast op immunofenotypering als een trigger voor de signaalverwerking.
Side Strooilicht

Side - verstrooid licht verwijst naar het licht gebroken op een mobiele interface, die wordt na ongeveer 90 graden van de laserbundel as aan de zijde verstrooiing kanaal ( SSC ) en de desbetreffende detector verlengd door een bundeldeler . Side strooilicht is ongeveer gelijk aan cel granularity of interne complexiteit , en wordt gebruikt om de korrelige inhoud van cellen te bepalen . Zij-en forward - verstrooid licht in combinatie worden gebruikt om onderscheid te maken tussen de verschillende celtypen .
Fluorescentie

Fluorescentie biedt zowel kwantitatieve als kwalitatieve informatie over intracellulaire moleculen zoals cytokines en DNA en celoppervlak receptoren , met fluorochroom labels en meten bij verschillende golflengten . Elke fluorochroom label heeft een specifieke golflengte belde waarbij licht wordt geabsorbeerd heet het absorptiespectrum . Fluorescentie functioneert als een foton van licht wordt uitgezonden door een aangeslagen elektron na lichtabsorptie .