Hoe LB agarplaten Voeg

Agar is een geleiachtige substantie , vervaardigd uit rode algen en gebruikt voor verschillende doeleinden . Een van de voorkomende vormen van gebruik is als een kweekmedium voor bacteriën. LB agar nutriënt agar dat is gecombineerd met lysogenie bouillon ( LB ) . Het is een algemeen gehouden misvatting dat LB staat voor Luria - Bertani . Echter, de uitvinder , Giuseppe Bertani , stelt in zijn paper " lysogenie bij midden van de twintigste eeuw: P1 , P2 , en andere experimentele systemen , " dat de initialen altijd bestemd waren voor lysogenie bouillon te staan ​​, niet zijn naam en die van zijn coresearcher , Salvador Luria . LB agar is veelzijdig en vrij eenvoudig te maken . Wat je
nodig voor 1 liter afgewerkte medium :
Schaal en een gewicht van papieren of trays
1 - L maatcilinder
1 L gedestilleerd of gedemineraliseerd water
2 - L Erlenmeyer
10 g trypton
5 g gistextract
5 g noniodized tafelzout
15 g agar
aluminiumfolie
Waterdichte ovenwanten
autoclaaf of snelkookpan
Steriel Petri platen
Toon Meer instructies
1 Gebruik een erlenmeyer die twee keer het volume van het medium dat u wilt voorbereiden houdt .

Plaats de trypton , gistextract en zout in de Erlenmeyer . kopen van 2 Let goed op de druk van de autoclaaf of snelkookpan wanneer steriliseren .

Voeg de gedestilleerd of gedemineraliseerd water en meneer of schud de meeste van de droge ingrediënten te ontbinden .
3

Voeg de agar en blijven schudden of roeren . Alle van de agar lost niet op , maar het is belangrijk dat je het grootste deel van het in oplossing . Vermijd grote klonten van onopgeloste agar vestigen in de bodem van je fles .
4

Sluit de opening van de kolf met folie.
5

Plaats de kolf in een autoclaaf - verpakking.
6

Giet ongeveer 1 cm water in de container .
7

Zet de container en fles in de autoclaaf . Stel de autoclaaf een vloeibare cyclus steriliseer minstens 20 minuten . Als u gebruik maakt van een snelkookpan voor sterilisatie , ga dan naar stap 8. Ga anders door naar stap 10.
8

Als u gebruik maakt van een snelkookpan , plaats een kleine hoeveelheid water in de pan en zet de kolf in het water . Probeer niet meer dan 250 ml steriliseren in een tijd met deze methode.
9

Breng de snelkookpan tot ongeveer 20 psi en steriliseer gedurende ongeveer 30 minuten .
10

Neem de kolf uit de autoclaaf of snelkookpan , het verzorgen als de kolf zal heel heet zijn .
11

Schud de kolf voorzichtig eenmaal sterilisatie is voltooid. Dit zal de agar gelijkmatiger te verdelen in uw oplossing .
12

Zet de kolf op een geschikte ondergrond en laat ze een beetje afkoelen. Als je 1 L of meer van medium hebben voorbereid , geef het een zachte krul elke 10 tot 20 minuten . Je zult in staat zijn om te vertellen dat het medium voldoende is afgekoeld als je de achterkant van je vingers tegen de kolf kan houden ongeveer 2 seconden , zonder dat het onaangenaam warm aanvoelt. Wacht ongeveer 15 tot 20 minuten voordat dit.
13

Plaats een petrischaal op een vlakke ondergrond . Til het deksel schuin , zodat de meeste van de schotel overdekte overblijft . Til het deksel direct van de plaat.
14

Giet het medium uit de kolf in de petrischaal totdat het gerecht is ongeveer half vol .
15

onmiddellijk vervangen het deksel , zet de plaat opzij en ga naar de volgende totdat alle gewenste platen zijn gevuld . De platen zullen hun stolling afleggen in ongeveer 30 minuten .
16

Plaats de petrischalen in de steriele zak waarin ze zijn aangekomen of een andere geschikte , steriele verpakking als u ze niet inenten van meteen. Dicht de houder om vocht te behouden . Label indien gewenst de platen . Als u het opslaan van de platen , moeten ze bij een temperatuur van ongeveer 39 tot 40 graden F.

worden gehouden