Perfusie techniek

De perfusie techniek zorgt voor een snelle en uniforme bevestiging aan alle individuele cellen aanwezig in weefsel . Een 4 procent paraformaldehyde fixeermiddel wordt via het vasculaire systeem doorgegeven aan weefsel van belang te verkrijgen . De belangrijkste target site geneesmiddeltoediening in een bepaald orgaan kan worden geïdentificeerd met behulp van deze techniek . Perfusie heeft ook geholpen wetenschappers om de structurele en functionele organisatie van het menselijk brein te begrijpen. Wat je nodig hebt
Animal (rat of aap ) op Twitter perfusiepomp , beker
Fixative ( 4 procent paraformaldehyde ) op injectienaalden
perfusie druppelen ingesteld
Schaar
Scalpel
Pincetten
0,9 procent zoutoplossing
Ice box
Toon meer instructies
1

Bereid vers 4 procent paraformaldehyde door het mengen van 40 g paraformaldehyde in 800 ml water . Verwarm de oplossing tot 60 C onder roeren . Koel de oplossing tot 4 C. Breng de pH op 9,5 met behulp van een pH-meter . Voor het aanpassen van de pH , voeg ijsazijn om de gewenste pH te verkrijgen kopen van 2

Stel de perfusie pomp ; . Hechten alle glazen delen en een perfusie naald . Run 100 ml leidingwater door de slang van de perfusie pomp om alle residuen van de glazen onderdelen te verwijderen . Plaats een beker van fixeermiddel in een ice box .

Open 3 het einde van de perfusie buis en plaats deze in een fixatief beker . Schaal de volume oplossing volgens de grootte van het dier . Pas nu de perfusie pomp afsluiter een langzame, gestage druppelen . Sluit de klep . Vul het perfusie apparaat met 0,9 procent ( gewicht /volume ) zoutoplossing .
4

Stel de chirurgische instrumenten die in de buurt van de operatietafel . Geef een anesthesie-injectie aan het dier volgens zijn lichaamsgewicht ( ketamine 0,5 mg /kg ) . Leg het dier op de operatietafel met de rug naar beneden.
5

Maak een snede met een scalpel , langs de lengte van het membraan . Met de grote schaar , botte kant naar beneden , snijd het bindweefsel onder aan het membraan . Expose het hart . Houd het kloppende hart met de tang en plaats een naald in de linker ventrikel .
6

Open het ventiel van de perfusie pomp om de stroom van 0,9 procent zoutoplossing toe . Zorg ervoor dat de oplossing is vrij stroomt en het dier in leven . Het hart van het dier moet constant worden gewonnen . Zodra het bloed wordt vervangen door de zoutoplossing , veranderen de oplossing tot 4 procent paraformaldehyde .
7

Stop de perfusie en ontleden een weefsel van belang . Houd weefsel in hetzelfde medium bij 4 C.