Beschrijving van een tuberculose Gram Stain

Tuberculose is een infectieziekte die wordt veroorzaakt door Mycobacterium tuberculosis . Tuberculose is een ziekte van de luchtwegen gekenmerkt door formaties van tubercules , necrose , abcessen , fibrose en verkalking in de longen . Het kan ook infecteren de nieren , lymfeknopen , botten , gewrichten en skin.Primary laboratoriumdiagnose van Mycobacterium tuberculosis brengt kleuring om de bacteriën te visualiseren onder de microscoop . Het monster van keuze is sputum of bronchoalveolaire lavage aan een luchtweginfectie of een feitelijke weefselmonster identificeren. Fysiologie

Mycobacterium tuberculosis is een staafvormige ( bacillen ) , niet-beweeglijke , niet- sporing , obligaat aëroob . Ze meten 0.4x3 micrometer in lengte. Mycobacterium tuberculosis ondergaat binaire fissie ( reproductieve celdeling ) om de 15 tot 24 uur, die is langzaam vergeleken bij andere bacteriën. Hierdoor kan de mycobacterie oplopen tot negen weken op kweekmedia .

Mycobacterium tuberculosis gevoelig is voor UV-licht en warmte ( bijvoorbeeld pasteurisatie ) maar bestand tegen chemische ontsmettingsmiddelen .

gram Stain

Mycobacterium tuberculosis kan niet echt worden aangemerkt als grampositieve of gramnegatieve . De gram classificatie is gebaseerd op de hoeveelheid peptidoglycaan celwand van een bacterie . Een Gram-positieve bacterie een dikke peptidoglycaanlaag ( ongeveer 90 procent ) , terwijl een gram negatieve bacterie een dunne peptidoglycaanlaag ( 5-20 procent ) . De gram kleurstoffen penetreren de celwand binden met de chemische componenten in de celwand . De gebrandschilderde bacteriën paars of roze verschijnen onder de microscoop .

Met Mycobacterium tuberculosis , wordt de celwand bestaat uit peptidoglycan maar ook complexe lipiden , die gram kleurstofpenetratie remmen. De celwand weerstaat ook ontkleuren door zuur of alcohol , dus de Mycobacterium worden " acid - fast . " De celwand lipiden zijn mycolzuur , koord factor en wax - D . Als de bacterie te worden gemerkt , zou de bacteriële cellen zwak gram- positieve of bleek met zeer weinig kleur verschijnen .

Om de bacterie te visualiseren , moet speciale vlekken zoals de Aumarine beits of de Zhiel - neelson vlek zijn uitgevoerd .
Auramine - rhodamine vlek

De Auramine - rhodamine proces maakt gebruik van een gele fluorescerende kleurstof aan Mycobacterium tuberculosis onder een fluorescentie microscoop te visualiseren . Kaliumpermanganaat of acridine oranje kan worden gebruikt als een tegenkleuring . Onder de lens , zal de bacteriële cellen blijken groen .

Auramine - rhodamine vlek is gevoeliger dan de Zhiel - neelson en meer kosteneffectief.
Ziehl - neelson vlek

De Ziehl - neelson vlek is ontstaan ​​uit wetenschappers Franz Ziehl en Friedrich Neelsen . Het maakt gebruik van verwarmde carbol fuchsine , hoge concentratie zuur - alcohol en een tegenkleuring zoals malachietgroen of methyleenblauw . Onder een fluorescentiemicroscoop , zal de bacteriële cellen felroze verschijnen .

De Ziehl - neelson is de gouden standaard voor de primaire identificatie van Mycobacterium tuberculosis en Mycobacterium leprae .
Agar

Secundair aan identificatie microscopie , moet Mycobacterium tuberculosis worden geteeld op bijzondere cultuur agar . Lowenstein - Jensen agar heeft complexe organische stoffen (bijv. ei, aardappel) , zouten , glycerol en malachietgroen ( remt andere bacteriën ) . Antibiotica kunnen worden toegevoegd aan besmettelijke bacteriën verder te remmen . Het monster wordt geplaatst op agar , en de bacteriën groeien in drie tot negen weken .

Een kweekoplossing van voedingsstoffen zoals albumine en biotine kunnen worden gebruikt om de groei van zelfs de kleinste hoeveelheid de verantwoordelijke bacteriën ondersteunen . Dit staat bekend als Middlebrook 7H9 ( of 7H12 ) medium .

De kolonies zullen als kleine , afgeslepen , lichtbruin kolonies op beide .

Met geavanceerde technologie , kan Mycobacterium tuberculosis nu worden geteeld met behulp van een geautomatiseerde lezer . Een vloeibare oplossing van Middlebrook 7H9 medium en een fluorescentie-indicator verbinding wordt gebruikt om de groei te volgen en rapporteren positieve of negatieve infectie.