Genetische Protocollen

Genomic DNA vormt de blauwdruk voor cellen om te organiseren in levende organismen . DNA bevat vier herhalen stikstofbasen genoemd adenine , guanine , cytosine en thymine . Onderzoekers hebben met succes bepaald de gehele basensequentie , het genoom voor vele complexe organismen waaronder de mens . Er zijn veel belangrijke redenen om een ​​genoom sequentie . Genetica betreft ontdekking van genetische afwijkingen veroorzaken ziekten zoals diabetes , Alzheimer en kanker . Evolutionair genetici vergelijken genomen van verwante soorten nauwkeurige taxonomie ontwikkelen. Basis genetische protocollen in onderzoek zijn hetzelfde, ongeacht het doel van het onderzoek . Het isoleren van DNA uit cellen

Genetisch onderzoek vereist extractie van een zuiver DNA monster van cellen . Een basis protocol begint door het verstoren van en het verwijderen van de beschermende celwanden van planten of dierlijke celmembranen met een enzym lysozym . Niet - genetische celbestanddelen in de vorm van precipitaten verwijderd door snelle spinnen met een centrifuge , terwijl DNA in oplossing blijft . DNA wordt vervolgens geprecipiteerd in de aanwezigheid van natriumacetaat zout met ethanol . Final centrifugeren neerslagen en pellets zuiver genetisch materiaal voor onderzoeksdoeleinden.
Polymerase Chain Reaction

Genetisch onderzoek vereist voldoende kopieën van bepaalde DNA- regio's. De polymerasekettingreactie of PCR , is een werkwijze voor exponentieel van kopieën van DNA . Het protocol heeft gezuiverd DNA , Taq-polymerase , basen genaamd deoxynucleotiden en kleine DNA-strengen aan premier het aangewezen gebied . Het reactiemengsel wordt in een thermocycler , een instrument dat snelle temperatuurwisselingen . Verwarmen van het mengsel tot 95 graden Celsius scheidt dubbelstrengs DNA , daarna afgekoeld tot 48 graden, zodat primers kunnen zitten of gloeien , om passende basen . De temperatuur wordt verhoogd tot 72 graden toen Taq-polymerase assembleert deoxynucleotiden , gebelde toestel , in een nieuwe kopie van het DNA .
Genetische DNA Sequencing
Sequencing gegevens worden weergegeven als gekleurde bands aanwijzing van DNA-basen .

Geautomatiseerde sequencing wordt gebruikt om exacte basenvolgorde te bepalen en te vergelijken met de normale abnormale DNA. Het protocol voegt fluorescent gelabelde dideoxynucleotiden of ddNTP , normale PCR reacties , die willekeurig stopt verlenging van DNA -fragmenten . De producten zijn verschillende DNA-fragmenten door een enkele basis. Elk type basis heeft een andere kleur. De eindproducten worden geladen op een geautomatiseerde sequencer , een instrument ontworpen om fragmenten te scheiden op grootte op een polymeer met behulp van elektrische stroom . Wanneer de fragmenten bereikt de polymeer eindpunt , een digitale camera registreert de basiskleur en stuurt de gegevens naar de computer voor analyse .
Genotypering en DNA-fingerprinting
DNA fingerprinting wordt gebruikt om menselijke identificeren blijft .

Genotypering is een methode die kleine segmenten van genoom vergelijkt ve organisme naar het andere . Het doel is kleine verschillen in PCR fragmentgrootte gevolg van normaal of toevallige base veranderingen in DNA te detecteren . Het protocol ontwerp begint met basis PCR met behulp van een fluorescent gelabelde primer voor detectie op geautomatiseerde sequencers . Gelabelde producten worden op grootte gescheiden en opgenomen met een digitale camera naar een computer voor analyse . Genotypering protocollen zijn ontworpen voor forensische identificatie, DNA-fingerprinting en vaderschap of identificatie van genetische afwijkingen die leiden tot ziekte .