Hoe Buffers blokkeren

Blokkeer buffers worden gebruikt om beklede eiwitten in immunochemische assays stabiliseren en volgens Immunochemistry Technologies , die ruis in de resultaten van afzonderlijke tests , de gevoeligheid van de test , de efficiëntie en houdbaarheid van het beklede platen en versterken reproduceerbaarheid . Blok buffers remmen aspecifieke binding na de eiwitten en antilichamen elkaar zijn verbonden en geabsorbeerd op het beklede testplaat in een ELISA ( een enzym- linked immunosorbent assay ) . Omdat ELISA kan worden gebouwd op verschillende manieren , zijn er verschillende mogelijkheden voor het blokkeren buffers van individuele behoefte een technicus voldoen . Wat je
antilichaammonster
eiwitmonster
assayplaat nodig
Blokkeerbuffer
Laboratorium bekers
Pipette
Toon meer instructies
1

Selecteer uw blokkerende buffer afhankelijk van het type van de ELISA u zal uitvoeren . Keuzes van buffer omvatten : algemene blokkers ( eiwitten van zoogdieren steiger ) voor sandwich en antigeen -down ELISA's ; BB2 Neptunus blokkeren ( niet-zoogdieren eiwit steiger ) voor menselijke en zoogdiersoort ELISA's ; BB3 synblocks ( klein , synthetische moleculaire steigers ) voor hoge - sterkte blokkerende ELISA's ; en BB4 - phosph free ( kleine , synthetische , fosforvrije moleculaire scaffolds ) voor hoge , niet-specifieke enzym- gemerkt conjugaat bindende ELISA . De BB4 buffer blocker is bijzonder nuttig in assays die alkalische fosfatase gebruiken , chemisch behandeld of glas reactie borden en in microfluidics , zoals gerapporteerd door Immunochemistry Technologies , een bedrijf dat alle relevante test apparatuur levert . Kopen van 2

de vacht van de testplaat met uw antigen ( eiwit ) of het antilichaam door het gieten van de oplossing in de platen .
3

Aspireren (verwijder ) de coating oplossing door tikken op de plaat , zodat het overtollige wordt weggegooid in een afzonderlijke container .
4

Pipetteer 300 tot 400 microliter van de blokkerende buffer in elk putje van de testplaat met een pipet .
5

Incubeer de oplossing ongeveer drie uur of overnacht bij omgevingstemperatuur ( 4 ° C ) . Volgens de Cell Technology bedrijf, zal de juiste blok buffer instandhouding van uw reagentia , die waardevol kan zijn omdat ze zijn duur en kunnen niet in voldoende mate .
6

Was de overtollige eiwit aan overmatige hoeveelheden te verwijderen als kan de detectie van het doelantigeen verminderen , zoals gerapporteerd door Pierce Net .
7

op dit punt is de reactie voltooid en moet een afgewerkte plaat met de juiste hoeveelheid antilichaam gebonden aan antigeen , die consistente resultaten zal geven en verminderen plate - to-plate variatie in grote , vergelijkende testen .
8

in het geval van een microarray , gebruiken een geavanceerde blokkerende oplossing zoals Array het is Block It Buffer , die speciaal is ontworpen om elk reactieve groepen die overblijven na een "print" van substraten op dia's met super - epoxy , super - amine en super - aldehyde met behoud van scherpte van resulterende signaal , het voorkomen van fluorescentie en faciliteren ruisonderdrukking inactiveren. Dit reagens heeft een houdbaarheid van een jaar indien correct opgeslagen , is zeer zuiver en wordt geleverd als een kant-en -klare concentraat .