Paraffine Embedding Protocol

Wetenschappers meestal nodig om biologische monsters stollen paragraaf ze af . Dit maakt het voor wetenschappers kleurstoffen , antilichamen en probes toe te voegen aan het biologische monster . Het vermindert ook de overlay van verschillende cellagen . Wetenschappers gebruiken paraffine als een harde matrix voor het snijden , omdat de paraffine niet mengen met water . Paraffine is een soort koolwaterstof . De biologische monsters bevatten water , dus moeten de wetenschappers de monsters ontwateren met behulp van steeds meer geconcentreerd ethanol baden . Xyleen

Wetenschappers verwijder de ethanol met xyleen . Dan gebruiken ze gesmolten paraffine de xyleen te verwijderen . Voor lichte microscopie , de paraffine secties zijn meestal vijf micrometer dik. Paraffine is niet hard genoeg voor dunnere plakjes. Wetenschappers rehydrateren het weefsel met behulp van xyleen eerst, dan ethanol . Spoel dan ze het biologische monster met gedestilleerd water om contaminatie te voorkomen .
Fixing

paraffine - ingebedde weefsels worden meestal bevestigd met neutraal gebufferde formaline , dat is de commerciële versie van formaldehyde . Dit omvat paraformaldehyde en methanol , waarbij de formaldehyde voorkomt omzetten in mierenzuur . Dun gesneden weefsels moeten 48 uur fixatie bij kamertemperatuur optimale histologie , dat de studie van microscopische anatomie . Anders zal het weefsel verharden en worden broos. Vóór de verwerking , wordt het weefsel meestal opgeslagen in 70 procent ethanol bij een temperatuur van 4 graden Celsius .
Paraffine Processors

Wetenschappers gebruiken vaak paraffine processors te sturen het weefsel door baden die geleidelijk uitdrogen het materiaal voordat warme paraffine kan binnenkomen via de weefsels . Wetenschappers lopen de processor 's nachts . De processor verwarmt alleen het weefsel voor een bepaalde tijd afhankelijk van het weefsel om het niet hard en bros . De processor maakt gebruik van een vacuüm dat versnelt het doordringen van paraffine en verwijdert luchtbellen . Na verwerking wordt het weefsel opgeslagen in cassettes bij kamertemperatuur .
Wax Melting

paraffine smelt een uur voorafgaand aan het toevoegen van het weefsel . De gehele cassette wordt geplaatst in een 65 graden Celsius paraffine bad gedurende 15 minuten . Een koude aluminium koellichaam koelt de paraffine gedurende 20 minuten . Als de wax scheuren of de weefsels zijn niet goed uitgelijnd , de wetenschapper smelt de paraffine en herhaalt het proces .
Cutting

bij het snijden van de weefsels , de wetenschapper krijgt het waterbad tot 35-37 graden Celsius . Het water is fris en gedeïoniseerd . De blokken worden geplaatst gezicht naar beneden op een ijsblok of koellichaam voor 10 minuten . Een mes snijdt het blok in secties . Twee problemen die kunnen optreden zijn arm ribboning en fragmenteren exemplaren . Wanneer de monsters fragment , het water te heet . Of het blok niet goed lint , moet je het weer op het ijs blok en de onderneming van de was hem weer opstart .