Protocol voor DAPI vlek

DAPI staat voor de chemische 4' - 6 - diamidino - 2 - fenylindool , en wordt gebruikt om dubbelstrengs DNA vlekken . De verbinding vormt blauwe fluorescerende complexen met kernen van cellen en dus wordt vaak gebruikt om de structuur van de cellen te markeren . Het type en de dichtheid van vlekken kunnen ook dode of stervende cellen te identificeren . Voorbereiden van DAPI Oplossing

De DAPI oplossing moet eerst worden verdund tot een werkende oplossing . Zo moet 10 mg van de Invitrogen DAPI product worden gemengd met 2 ml gedeïoniseerd water , en vervolgens verder verdund tot 300 nano - molaire concentratie ( opvragen aanwezig op het product ) met fosfaat gebufferde zoutoplossing ( PBS ) .

voorbereiden sample

Bevestig het monster al naar gelang de aard van het te onderzoeken monster op een dia . Voeg 300 microliter van de DAPI werkoplossing het monster en incubeer 4:59 minuten . Spoel de dia met PBS .
Analyseren

Gebruik een fluorescentie microscoop te kijken naar de dia gemonteerde monster. De DAPI gebeitst kernen kunnen worden geïdentificeerd door een blauwe fluorescentie .