De TMRE Protocol

tetramethylrhodamine ethyl ( TMRE ) is een "slow , lipofiele , kationische fluorescerende reditribution kleurstof " in de MitoPT ™ TMRE /TMRM mitochondriaal Membraanpotentiaal Assessment Kit , vervaardigd door Immunochemistry Technologies , LLC . Het proces helpt een transmembraan elektrische potentiaal gradiënt in cellen bekijken . Voorbereiden van de Assay

Het protocol is eenvoudig te volgen , en duurt ongeveer 20 minuten om te verwerken bij 37 graden Celsius . De levende cellen die in de test kan enkele uren tot enkele dagen voor te bereiden voor gebruik. De controle cellen kan enkele uren duren voor te bereiden , als ze moeten worden geïnduceerde apoptose ondergaan .
Protocol Deel 1

Cultuur cellen een dichtheid optimaal is voor apoptose of oxidatieve stress inductie , volgens uw specifieke inductie protocol , maar niet meer dan 10 ( 6 ) cellen /ml .
Protocol Part 2

Terzelfder tijd, cultuur een niet - geïnduceerde negatieve controle cel populatie ( bij dezelfde dichtheid als de geïnduceerde bevolking .
Protocol deel 3

apoptose of opzet depolariseren de mitochondriën volgende uw gewenste protocol .
Protocol deel 4

Bereid 1X Assay /Wash Buffer .
Protocol Parts 5-8

Bereid de 1 mm of 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM voorraad . Voor Protocol deel 6 , bereiden een 1:100 verdunning van de 1 mm, of een 1:20 verdunning van de 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM oplossing voor stekelige in celcultuur monsters .

Protocol deel 7 , vlek cellen met behulp van een uiteindelijke 20-200 nM concentratie van MitoPT ™ TMRE /TMRM oplossing .

voor Mijn Protocol deel 8 , het analyseren van de gegevens .